Das Tagesseminar richtet sich an HPLC-Anwender, welche die LC-MS-Detektion in ihrem Labor einsetzen oder in diese Technik einsteigen möchten. Grundlagen und Besonderheiten dieser Technik werden ebenso behandelt wie die Ermittlung quantitativer Ergebnisse.
Grundkenntnisse in der HPLC werden vorausgesetzt. Wir empfehlen den vorherigen Besuch der Seminare: "Grundlagen der HPLC" und/ oder "HPLC Troubleshooting und Methodenentwicklung".

Die LC-MS-Technik ist eine weitverbreitete und gängige Kopplungstechnik. Besonders beliebt ist die Kopplung von Trennmethoden wie RP-LC und HILIC mit der Massenspektrometrie. Welche der beiden Kopplungen wirklich Sinn macht, hängt von der zu untersuchenden Probe ab. So ist z.B. für die Untersuchung polarer Moleküle wie Metabolite, die HILIC-MS-Kopplung und für die Analyse von PAKs oder Polyphenole in pflanzlichen Extrakten die RP-LC-MS Kopplung prädestiniert.

Neben diesen Kombinationsmöglichkeiten sind auch MS-MS-Kopplungen denkbar, die eine große Rolle bei der Strukturaufklärung von Molekülen spielen.

In diesem Seminar erfahren die Teilnehmer die Vor- und Nachteile einzelner Ionisierungsmodi und erhalten Tipps für die Wahl von mobiler Phase und Puffersystemen. Das Ziel dieses Seminars ist es, Grundkenntnisse in der LC-MS zu vermitteln und über praktische Tipps den Einstieg in diese Technik zu erleichtern.

Einführung in die LC-MS-Kopplungstechnik

• Grundlagen der Massenspektrometrie, (Isotopenmuster, Auflösung, Massengenauigkeit, Empfindlichkeit)
• Grundlagen der HPLC (RP-LC und HILIC)
• Kopplungstechniken und Ionisierung: ESI, APCI, APPI
• Erläuterung unterschiedlicher Gerätetypen und deren Einsatzmöglichkeiten

LC-MS in der Praxis

• Einführung in die Methodenentwicklung
• Auswahl von Lösungsmitteln und Additiven (Säuren, Basen, Salze)
• Sensitivitätstest, Kalibration
• Performance-Test, (Re-)Kalibrierung und Wartung
• Messung und Berechnung von Auflösung, Massengenauigkeit, S/N und Empfindlichkeit
• LC-MS-Fehlersuche

Applikationsbeispiele und Auswertung

• Vergleich von ESI und APCI
• Auswertung von Spektren und Isotopenmustern Stickstoffregel
• Molekülionen, Adduktbildung, Mehrfachladungen
• Fragmentierung, MS/MS, MSn
• MS/MS Messmodi
• Erstellen und Verwenden von Spektrenbibliotheken
• Matrixeffekte
• Erläuterung der Messmodi (EIC, SIM, MRM)
• Quantifizierung
• Multikomponentenanalytik, sMRM

Das Tagesseminar richtet sich an LC-MS (teilweise auch an GC-MS) Anwender, die ihre Kenntnisse in der Interpretation von Massenspektren weiter ausbauen wollen. Grundlagen und Besonderheiten der Spektrenauswertung werden ebenso behandelt wie die Erstellung und Verwendung von Spektrenbibliotheken.

Grundkenntnisse in der Massenspektrometrie werden vorausgesetzt. Wir empfehlen den vorherigen Besuch der Seminare: "Grundlagen der Massenspektrometrie und "LCMS-Kopplungstechniken".

Die Massenspektrometrie ist ein nicht mehr wegzudenkendes Instrument zur Aufklärung unbekannter Strukturen und zur  Analyse komplexer Gemische sowohl in der chemischen als auch der biochemischen Analytik.
Die Interpretation der gewonnenen Daten ist eine echte Herausforderung. Die Ergebnisse der vorhandenen software-gestützten Auswertungen sind nur dann verlässlich interpretierbar, wenn vertiefte Kenntnisse zu den Grundlagen der Messungen selber als auch der Auswertung von Massenspektren vorhanden sind. Somit lassen sich Fehler schnell aufspüren und Ergebnisse richtig interpretieren.
In diesem Seminar werden Strategien und Vorgehensweisen zur Interpretation von MS-Spektren erarbeitet. Durch praktische Übungen werden die Möglichkeiten der Auswertung vermittelt, in gängige Software eingeführt und deren Vor- und Nacheile erläutert.  Ziel des Seminars ist es, zukünftig Spektren selbstständig interpretieren zu können.

Einführung und Wiederholung von MS-Grundlagen

• Ionisierungsverfahren 
• Typen und Eigenschaften von Massenanalysatoren
• Aufbau und Terminologie von MS-Spektren

 
Grundlagen der Interpretation von MS-Spektren

• Fragmentierung und Fragmentierungsmethoden
• Elementarzusammensetzung (stabile Isotope, Ringe und Doppelbindungen)
• Moleküle (Stickstoffregel, Abspaltung von Neutralteilchen)

Auswertung und Interpretation von Spektren

• Besonderheiten durch das Ionisierungsverfahren (Mehrfachladungen, Isotopenmuster)
• Fragmentierung (MS/MS)
• Manuelle Auswertung von MS-Spektren von kleinen Molekülen
• Manuelle Auswertung von MS-Spektren von Peptiden
• Software-unterstützte Auswertung von MS-Spektren von kleinen Molekülen
• Software-unterstützte Auswertung von MS-Spektren von Peptiden

Strukturaufklärung

• Vergleich mit MS-Datenbanken
• Spektrenbibliotheken